LC-MSMS 真空系统常见问题与维护保养
新一届的原创大赛就要开始了，很期待看到大家的作品啊，自己常年潜水，接触质谱1年多，时间很短，但是很想跟大家分享一下自己的学习心得，文笔不是很好，大家将就看啊。
兰
1. 真空系统维护之灵敏度下降
大家做LCMS连用的时候肯定经常碰到灵敏度下降的情况，这时候该怎么做呢，是系不稳定，喷雾不正常，四级杆脏了，真空系统有问题，让我给大家一一道来。那么大家该怎么做呢？先看一下离子通道的概况：
首先，源头做起，排除是离子源的问题，大家先看下一般喷雾的结构：
能产生喷雾一般需要3个条件：喷雾电压，喷雾气，液滴
做法是：针泵流速开到100ul/min，只开雾化气，要看到喷雾情况，一般用手推进样针要是没什么阻力，一般喷雾针就是没问题的，还有大家要排除一下喷雾电压有没有。
一般喷雾针堵住了话，手推阻力肯定大，容易出现TIC图不稳定；雾化气有问题的话一般也是TIC 不稳，如果没有TIC图，那一般要看看雾化气有没，喷雾电压有没，啥也不开的时候手推出不出液。
如果大家排除了离子源问题，那就是离子通道这快了，大家可以这么做：大家单独激活MS，就是不接液相，一般进来mannul tune界面，大家用调谐液直接针泵直接进样，先Q1 Sacn ,设置好参数，开始，然后看看质谱的状态，查看下真空度（不知道看真空的亲们见下图），一般是0.9~1.3左右的。
如果真空特别好，比如0.6，一般是离子传输这快有问题。那有人肯定要说是orifice堵住了，对，一般情况下是这样的，但是这时候我们先不要急。先看看Q1TIC 图在说,如果稳不住，右边的intensity也不高；然后观察Q3 scan，如果Q3 也稳不住，一般就是QO脏了，要清洗，如果Q3 是稳定的那Q1 应该脏了。一般四级杆脏了，真空会特别好，典型特征就是灵敏度不够。
Q1 TIC：
Q3
这时候主要清洗Q0：
具体步骤：
Step1：按下质谱关机电源，然后让机械泵继续工作15分钟，让分子泵降速，仪器放空；
Step2：关闭机械泵开关；
Step3：把质谱的电源线拔掉，一般都是10A的线,为了安全啊；
Step4:拿掉离子源，离子源左右有个扳手，扳下就行，拉出来；
Step5：拿掉curtain plate，orifice，skim，这时候就能看见Q0了，但是因为只漏出来一点点，先卸掉下面的KF25的接头，连机械泵那个，断开下面黑色的线，然后要继续拿掉vacuum interface 上的四个螺丝，见下图；
要用内六角卸掉，大家卸这4个螺丝要注意，因为这个interfacehook up 卸掉之后会掉下来，所以建议先卸下面的2个螺丝然后用手托一下，防止碰坏Q0，下图是AIP 4000的真空结构示意图，大家可以看一下：
Step 6：卸完interface hook 后就可以看见Q0了，这时候大家就开始洗Q0了，那怎么洗呢？首先跟大家讲一下洗四级杆一般需要无尘纸跟色谱methanol；先把无尘纸折成一条子，然后倒一点methanol在上面，对折一下然后就开始擦洗四级杆，注意动作一点要忙，一般每个杆洗2遍，然后用棉签蘸一点methanol把q0到q1中间的小孔擦一下，这个多擦几遍；curtain plate，orifice，skim的清洗一般先用50%的methanol water 洗，然后再用methanol 洗，洗的时候可以orifice放在烧杯上，用methanol 在orifice上的小孔往下滴，一般洗完后都要用氮气吹干，一点要注意轻拿轻放，手势就按下图的来啊。
我们洗完Q0后就按原来拆的顺序装回去，然后开机抽真空，但是要注意，要先开机械泵，因为刚清洗过Q0 前面的中性溶剂分子可以能比较多，机械泵开个20分钟再说，开机械泵的时候按一下oriface，然后插上质谱电源线，然后按下开关，仪器开始抽真空，
这时候真空那个灯会闪，是正常的，一般真空要抽过夜的，第2天来调谐一下，顺便校正仪下仪器应该就好了。
有时候灵敏度太差了，就应该需要清洗四级杆了，这时候具体步骤：
Step1:正常关机，卸真空，前面讲过了；
Step2：拆掉Q1 Q3的RF+DC的connection，一起共有4个，拆的时候要慢要轻哦；
Step3:现在需要移除CEM model，先把后面的CAD Gas Connetor断开，移除ion 传输线，
还有数据传输线，然后移除CEM信号板后面的2个螺丝，用内六角的，移除CEMmodel，注意要放在干净的白纸，最好用锡纸包起来；
Step4：移除离子通道跟真空腔后面的四个螺丝，这时候四级杆就可以抽出来了，可以先松开Q0跟Q1接头那块的3个螺丝，这个松的时候要注意不要碰到Q0，然后把四级杆后面抽出来，抽出来的时候要注意手拿稳，并且旋转180度，因为板子是在下面的，拿出来后放在事先铺好的白纸上面；
Step5：根据自己的情况，拆除需要清洗的Q1，Q2，Q3等，每拆一步都拍照片，注意洗的时候都要用methanol，洗完后氮气吹干。
2. 真空系统维护之真空度问题
大家都知道真空度是液质之所以能工作的必备条件，日常中我们遇到的要么就是真空度过好或者过差，下面分开来讲：
2.1 真空度过差
真空度过差可能是由系统漏气，机械泵，分子泵几个原因造成的。
系统漏气一般比较少，机械泵典型的就是抽力不够，处理办法就是换泵油啊，具体步骤就是：
Step1：正常关机，前面讲过了；
Step2：卸掉真空，注意拆真空KF接头的时候要慢点，以为有负压，过快会对分子泵造成伤害，亲们。
Step3:接下来就是换泵油了，把泵抬到高一点的地方，打开下面放油的螺丝，然后再泵上面加油口加油就行了，一般3~~6月就
需要更换泵油，亲们按下面的图自己换啊。
2.2 真空度过好 这个一般就是仪器脏了或者堵住了 什么的 大家看情况 清晰 Q0 Q1 什么的；
3. 真空维护之分子泵和控制器更换
大家都知道LCMSMS 真空的维持主要靠分子泵跟机械泵保持，但是随着仪器使用的，分子泵难免会坏，下图是自己画的，自己对分子泵的理解 ，同时也找了点图片配合帖子。
分子泵如果出问题 可以通过诊断软件看，大家看看就行反正都是工程师 干的活，哈哈，换的时候一般就是正常关机泄真空 ，分子泵比较重一般要2个人，换完泵之后需要进行软启动操作保护泵。
下图是3000的分子泵550图片
4. 调谐校正
4.1 一般真空维护系统后基本都要调谐，先跟大家讲一下调谐的基本原理。大家都知道四级杆是一种低分辨力的质量检测器，四级杆中重要的3重四级杆主要作用还是用来定量，一般用于DMPK，残留实验室。
调谐就是为了使质谱维持正常的分辨力，就是跟大家色谱峰一样，相近的M/Z能分的开，对于四级杆那说一般用半峰宽表示，那到底调谐调的是四级杆中什么参数呢？那我们先来看一下四级杆的原理：
服务费：
一句话总结：就是四级杆是有RF+DC，RF条件下离子就在里面螺旋转，然后加个DC离子就往前面跑了 ，DC+RF
然后离子就螺旋转往前面走，其中RF是交流电压，DC是直流电压。质谱中一般都是直流，离子源那块有高压,CEM 那块也有，RF是交流，其余大部分是直流电。那么API 仪器调的是什么呢，就是其中的一个DC电压，软件上面的OFFset，见下图
4.2 实际调谐过程：
API类调谐一般是使用PPG标准溶液，正负离子是分开的，不像agilent tuning mix 是正负离子混合的，就是
正离子用PPG 正离子调谐，调谐完也用正离子校正，负离子用PPG 负离子调，不同的仪器调谐用的PPG浓度不同，
见下图：
下面以API 4000为例来讲 吧。
4.2.1 打开电脑，连接软件，激活massonly，装备好蠕动泵，在project选API Instrument，双击mannul tune，然后听到exgust气的声音，调处出以前的方法，把扫描实际改为10min，然后
把resolution中的offset调出来
得到一张几个独立的质谱图，见下图：
调谐的过程就是：在unit分辨力条件下，调offset使目标离子峰withs位于0.6~~0.8，withs越到，你就调高offset，要小范围的调，0.01的加减，慢慢的调，使质谱有完美的分辨力，大家调谐完之后就需要校正一下质量轴，按下图校正：
把cycle 改10次 ，mac 点上，然后点start 采集，就是把信号叠加10次，然后
大家校正完，然后再扫描一下看看质量轴有没有校过来啊 。
下图是API 4000的指标，如果目标响应没有达到，大家可能需要清洗Q0 什么的，前面讲过了
调谐可能说的比较简单，实际还是有些问题的，有问题呢可以来仪器论坛交流啊，原创就写到这，谢谢各位阅读啦。
质谱公众号，欢迎扫码关注
气相色谱公众号，欢迎扫码关注
液相色谱公众号，欢迎扫码关注